Rabu, 02 Desember 2009

Metode dan Cara Sterilisasi

Metode sterilisasi
1. Kimia : antibiotic, fenol, ammonium quarterner, alcohol, gas etilen oksid, formaldehid.
2. Radiasi : UV ( 253,7 nm ), rediasi plasma ( laser ), sinar gamma, ionizing radiation.
3. Fisika : panas
a. Panas kering ( 170oC, lebih dari 2 jam ). Alatnya oven.
Sediaan yang akan disterilkan dimasukkan ke dalam wadah kemudian ditutup kedap atau penutupan ini dapat bersifat sementara untuk mencegah cemaran. Jika volume tiap wadah tidak lebih dari 30 ml, panaskan suhu pada 150oC selama 1 jam. Jika volume dalam tiap wadah lebih dari 30 ml, waktu 1 jam dihitung setelah seluruh isi tiap wadah mencapai suhu 150oC. wadah yang tertutup sementara, kemudian ditutup kedap menurut teknik aseptic ( Anonim, 1978: 324 )
b. Panas basah ( uap ) : 121oC selama 15 menit. Alatnya autoclave.
Sediaan yang disterilkan diisikan ke dalam wadah yang cocok, kemudian ditutup kedap. Jika dalam volume tiap wadah tidak lebih dari 100ml, sterilisasi dilakukan dengan uap air jenuh pada suhu 115oC sampai 116oC selama 30 menit. Jika volume tiap wadah lebih dari 100 ml, waktu sterilisasinya diperpanjang, hingga seluruh isi tiap wadah berada pada suhu 115oC - 116oC selama 30 menit ( Anonim, 1978 : 323 ).
4. Mekanik : filter
- Maksimal partikel berdiameter 300nm
- Membrane dengan pori o,2┬Ám
- Larutan disaring melalui penyaring bakteri steril, diisikan ke dalam wadah akhir yang steril kemudian ditutup kedap menurut teknik aseptic ( Anonim, 1978: 324 ).
Cara uji sterilisasi antara lain :
1. Direct Inoculation of Culture Medium
- Media tioglikat cair yang mengandung glukosa dan Na.tioglikat. cocok untuk pengembangbiakan bakteri aerob. Suhu inkubasi 30oC – 35oC.
- Soya been casein digest medium merupakan medium yang membantu pertumbuhan bakteri anaerob dan fungi. Suhu inkubasi 30oC – 35oC, sedang fungi 20oC – 25oC.
2. Membran Filtrasi
Teknik yang banyak direkomendasikan farmakope, meliputi filtrasi cairan melalui membran steril. Filter lalu ditanam dalam media. Masa inkubasi 7 – 14 hari karena mungkin organism perlu adaptasi dahulu.
3. Introduction of Concentrate Culture Medium
Medium yang pekat langsung dimasukkan dalam wadah sampel yang akan ditumbuhkan. Tidak banyak digunakan, hanya dipakai bial ada kecurigaan akan adanya bakteri.

Tidak ada komentar:

Poskan Komentar